המאחז נגד סרטן: סמנים אוניברסליים לסרטן בלבד

סקירת מיני

המאחז נגד סרטן: סמנים אוניברסליים לסרטן בלבד

Chengchen Qian1, Xiaolong Zou2, Wei Li1,3, Yinshan Li4, Wenqiang Yu5

1Shanghai Epiprobe Biotechnology Co., Ltd, Shanghai 200233, China;2 המחלקה לכירורגיה כללית, בית החולים המסונף הראשון של האוניברסיטה הרפואית של חרבין, חרבין 150001, סין;3Shandong Epiprobe Medical Laboratory Co., Ltd, Heze 274108, סין;בית החולים לאנשים 4 של האזור האוטונומי Ningxia Hui, Ningxia Medical University, Yinchuan 750002, סין;5Shanghai Health Public Health Center קליני והמחלקה לכירורגיה כללית, בית החולים Huashan ומכון גרורות לסרטן ומעבדה ל-RNA Epigenetics, מכוני מדעיים ביו-רפואיים, המכללה הרפואית של שנחאי, אוניברסיטת פודן, שנגחאי 200032, סין

תַקצִיר

סרטן הוא גורם המוות המוביל בעולם.גילוי מוקדם של סרטן יכול להוריד את התמותה של כל סוגי הסרטן;עם זאת, חסרים סמנים ביולוגיים יעילים לגילוי מוקדם עבור רוב סוגי הסרטן.מתילציה של DNA תמיד הייתה יעד מרכזי לעניין מכיוון שמתילציה של DNA מתרחשת בדרך כלל לפני שינויים גנטיים אחרים שניתן לזהות.תוך כדי חקירת המאפיינים הנפוצים של סרטן באמצעות רצף מיקום חדשני עבור מתילציה של DNA, סדרה של סמני סרטן אוניברסליים בלבד (UCOMs) הופיעו כמועמדים חזקים לגילוי מוקדם יעיל ומדויק של סרטן.בעוד שהערך הקליני של סמנים ביולוגיים עכשוויים לסרטן מופחת על ידי רגישות נמוכה ו/או ספציפיות נמוכה, המאפיינים הייחודיים של UCOMs מבטיחים תוצאות בעלות משמעות קלינית.אימות הפוטנציאל הקליני של UCOMs בסרטן ריאות, צוואר הרחם, רירית הרחם וסרטן אורותל תומך עוד ביישום של UCOMs במספר סוגי סרטן ובתרחישים קליניים שונים.למעשה, היישומים של UCOMs נמצאים כעת בחקירה פעילה עם הערכה נוספת בגילוי מוקדם של סרטן, אבחון עזר, יעילות הטיפול וניטור הישנות.המנגנונים המולקולריים שבאמצעותם UCOMs מזהים סרטן הם הנושאים החשובים הבאים שייחקרו.היישום של UCOMs בתרחישים בעולם האמיתי דורש גם יישום וחידוד.

מילות מפתח

גילוי סרטן;בדיקת סרטן;מתילציה של DNA;אפיגנטיקה של סרטן;סמנים ביולוגיים לסרטן

למה אנחנו צריכים חדש בדחיפות סמנים ביולוגיים?

לאחר מאבק בסרטן במשך יותר ממאה שנה, הסרטן הוא עדיין האיום הביולוגי הקטלני ביותר על האנושות.סרטן נותר דאגה בריאותית עולמית עם 19.3 מיליון מקרים חדשים וכמעט 10 מיליון מקרי מוות המוערכים בשנת 20201. בשנת 2020 אובחנו בסין כ-4.6 מיליון מקרים חדשים של סרטן, המהווים 23.7% ממקרי הסרטן החדשים בעולם לפי GLOBOCAN1.יתר על כן, כ-3 מיליון מקרי מוות יוחסו לסרטן בסין בשנת 2020, שהם 30% ממקרי המוות העולמיים הקשורים לסרטן1.נתונים סטטיסטיים אלה הצביעו על כך שסין נמצאת במקום הראשון בשכיחות ובשיעור התמותה של סרטן.יתרה מכך, שיעור ההישרדות מסרטן ל-5 שנים הוא 40.5%, שהוא פי 1.5 נמוך משיעור ההישרדות ל-5 שנים בארצות הברית2,3.ההישרדות הנמוכה יחסית ושיעורי התמותה הגבוהים יותר בסין מאשר במדינות עם מדדי התפתחות אנושיים גבוהים מצביעים על כך שיש צורך בדחיפות במערכת מניעה ומעקב סרטן יעילה וחסכונית.גילוי מוקדם של סרטן הוא אחד המרכיבים הקריטיים ביותר במערכת הבריאות.גילוי מוקדם של סרטן יכול לשפר את הפרוגנוזה וההישרדות בשלב מוקדם כמעט בכל סוגי הסרטן4.אסטרטגיות סקר מוצלחות הובילו לירידה משמעותית בשכיחות ובשיעורי התמותה של סרטן צוואר הרחם, השד, המעי הגס והערמונית.

עם זאת, גילוי מוקדם של סרטן אינו משימה קלה.חקירת הביולוגיה והפרוגנוזה של סרטן מוקדם, זיהוי ואימות סמנים ביולוגיים לגילוי מוקדם מהימנים, ופיתוח טכנולוגיות גילוי מוקדם נגישות ומדויקות היו תמיד המכשולים הגדולים ביותר בתהליך4.זיהוי מדויק של סרטן יכול להבחין בין נגעים שפירים לממאירים, מה שעוזר להימנע מהליכים מיותרים ומקל על המשך ניהול המחלה.אסטרטגיות גילוי מוקדם נוכחיות כוללות ביופסיות מבוססות אנדוסקופ, הדמיה רפואית, ציטולוגיה, בדיקות אימונו ובדיקות ביולוגיות 5-7.בהיותן חודרניות ויקרות, ביופסיות המבוססות על אנדוסקופ נושאות נטל כבד מטבען בהיותן הליך רפואי גדול הנשען על צוות מקצועי.כמו ציטולוגיה, שתי שיטות ההקרנה תלויות באנשי מקצוע רפואיים ומבוססות על שיפוט אישי עם ביצועים רחוקים מלהיות אידיאליים8.לעומת זאת, מבחני אימונו אינם מדויקים ביותר, בהתחשב בשיעורים הגבוהים של חיובי כוזבים.הדמיה רפואית, כטקטיקת מיון, דורשת ציוד יקר וטכנאים מומחים.מכאן שההדמיה הרפואית מוגבלת ביותר בשל הנגישות הנמוכה.מכל הסיבות הללו, נראה כי סמנים ביולוגיים הם אופציה טובה יותר לגילוי מוקדם של סרטן.

התכתבות עם: Yinshan Li ו- Wenqiang Yu

Email: liyinshan@nxrmyy.com and wenqiangyu@fudan.edu.cn

מזהה ORCID: https://orcid.org/0009-0005-3340-6802 ו

https://orcid.org/0000-0001-9920-1133

התקבל ב-22 באוגוסט 2023;התקבל ב-12 באוקטובר 2023;

פורסם באינטרנט ב-28 בנובמבר 2023.

זמין בכתובת www.cancerbiomed.org

©2023 סרטן ביולוגיה ורפואה.קריאייטיב קומונס

רישיון בינלאומי ייחוס-לא מסחרי 4.0

סמנים ביולוגיים מסווגים כיום כחלבונים, סמני מוטציה של DNA, סמנים אפיגנטיים, חריגות כרומוזומליות, סמני RNA שמקורם ישירות מגידולים, או שברי גידול המתקבלים בעקיפין מנוזלי הגוף.סמני חלבון הם הסמנים הביולוגיים המיושמים ביותר בהקרנה ואבחון סרטן.סמנים ביולוגיים של חלבון, כסמנים ביולוגיים לסקר, מוגבלים על ידי הנטייה להיות מושפעים מנגעים שפירים, מה שמוביל לאבחון יתר וטיפול יתר, כפי שדווח עבור α-fetoprotein ואנטיגן ספציפי לערמונית (PSA)9,10.סמני RNA כוללים דפוסי ביטוי גנטיים וסמני RNA אחרים שאינם מקודדים. ניתן לזהות שילוב של סמני RNA ביטוי גנטי באמצעות דגימות שתן, שרגישותן הייתה רחוקה מלהשביע רצון (60%) לגידולים ראשוניים, וזיהוים יכול להיות מושפע מאופי הפירוק הקל של RNA בסביבה הרגילה11.סמנים גנטיים ואפיגנטיים מתמודדים שניהם עם בעיית השכיחות בגידולים והגבלה לסוגי סרטן.

מתילציה של DNA הייתה מועמדת חזקה כסמן ביולוגי לגילוי מוקדם מאז נקשרה לראשונה לסרטן על ידי פיינברג בשנת 198312. סטיות מתילציה של DNA נצפות בכל שלבי הסרטן, כבר בשלב הטרום סרטני.היפר-מתילציה חריגה של DNA מתרחשת בדרך כלל באיי CpG במקדמי גנים כדי לנטרל מדכאי גידול13,14.מחקרים גם העלו כי היפר-מתילציה חריגה של DNA עוסקת בוויסות העל של מווסתים התפתחותיים15.עמק המתילציה של ה-DNA, המזוהה בדרך כלל עם מווסתים התפתחותיים וסרטן היפר-מתיל, עשוי לשנות את מצב ביטוי הגנים למצב תלוי מתילציה של DNA יציב יותר ולהפחית את הקשר להיסטון מתיל H3K27me3 ולחלבוני פוליקומב הקשורים16,17.

בין המספר הגדול של סמני מתילציה של DNA שפורסמו, כמה מהם הופיעו בהצלחה בשוק;עם זאת, סמני המתילציה של ה-DNA הממוסחרים והפאנלים האבחוניים עדיין לא פתחו במלואם את הפוטנציאל של גילוי מוקדם של סרטן מסיבות מרובות18.למרות שרובם מראים ביצועים מקובלים תוך שימוש במידע על מסד נתונים, סמנים ביולוגיים אלה בדרך כלל מתפקדים פחות אידיאליים בעולם האמיתי, בשל העובדה שדגימות בעולם האמיתי הן לרוב מורכבות יותר ואינן מייצגות כמו אלו שנבחרו במסדי הנתונים.הוכח כי גילוי מוקדם של מתילציה מרובת סרטן מבוסס-רצף של הדור הבא הוכח כבעל רגישות של 16.8% ו-40.4% בלבד בסרטן בשלב I ו-II, בהתאמה19.בדיקות גילוי מוקדם דורשות יציבות רבה יותר וסמנים ביולוגיים מדויקים יותר.

גילוי אוניברסלי סרטן בלבד (UCOM) באמצעות רצף מיקום מדריך (GPS)

למרות עשרות שנים של חקר סרטן, מניעה וטיפול מספקים לא מומשו.נדרשות מתודולוגיות חדשות כדי לאפשר לחוקרים להעריך ביסודיות סרטן.במהלך 23 השנים האחרונות, 6 סימני היכר של סרטן, כגון התחמקות מאפופטוזיס, פלישת רקמות וגרורות וכו', הורחבו ל-14 על ידי הכללת מאפיינים כמו תכנות אפיגנטי לא-מוטציוני ומיקרוביומים פולימורפיים20,21.ככל שנחשפים יותר פרטים הקשורים לסרטן, יותר פרספקטיבות מוצגות לחקר הסרטן.חקר הסרטן הגיע בהדרגה לעידן חדש בשני כיוונים (משותף ואינדיווידואליות).עם התפתחות האונקולוגיה המדויקת בשנים האחרונות, המוקד של חקר הסרטן נוטה לעבר טיפול ממוקד פרטני והטרוגניות של סרטן22.לפיכך, סמנים ביולוגיים של סרטן שזוהו לאחרונה התמקדו בעיקר בסוגי סרטן ספציפיים, כגון PAX6 סרטן צווארי 23 ו-BMP3 לסרטן המעי הגס 24.הביצועים של סמנים ביולוגיים אלה הספציפיים לסוגי סרטן משתנים, אך עדיין לא ייתכן שאנשים רגישים יעברו סקר עבור כל סוגי הסרטן בו-זמנית עקב המגבלה של רכישת דגימות ביולוגיות והעלות הגבוהה.זה יהיה אידיאלי אם נוכל לזהות סמן ביולוגי יחיד וחזק, יעיל לכל סוגי הסרטן בשלב מוקדם.

כדי להשיג מטרה אידיאלית כזו, יש לבחור מועמד טוב יותר לסמן ביולוגי מרשימת סוגי הסמנים הביולוגיים הפוטנציאליים.סטיות מתילציה ב-DNA, בין כל הפרופילים הגנטיים והאפיגנטיים, ידועות כקשורות לסרטן והן חלק מהחריגות הקשורות לסרטן המוקדמות ביותר, אם לא הראשונות, שהתרחשו כרונולוגית.חקירת המתילציה של ה-DNA החלה מוקדם, אך הופרעה בגלל היעדר שיטות מחקר.בין 28 מיליון אתרי CpG פוטנציאליים בגנום, יש לזהות מספר ניתן לניהול וליישר אותו לגנום כדי להבין טוב יותר את התפתחות הגידול.ריצוף ביסולפיט שלם של הגנום (WGBS), הנחשב לתקן הזהב של רצף מתילציה של DNA, יכול לכסות רק 50% מה-Cs בתאי סרטן בשל אופי הטיפול בביסולפיט השובר שברי DNA ומוריד את מורכבות הגנום במהלך השינוי של Cs-to-Ts25.שיטות אחרות, כמו שבבים של 450 אלף, מכסות רק 1.6% מהמתילציה של הגנום.בהתבסס על 450 אלף נתונים, לפאנל לזיהוי מתילציה של DNA יש רגישות של 35.4% עבור 6 סוגים של סרטן בשלב I26.מגבלות של סוגי סרטן, ביצועים גרועים ורעש שנוצר על ידי שיטות זיהוי בתהליך האנליטי הפכו למכשולים הגדולים ביותר עבור לוחות זיהוי פאנל סרטן.

כדי לחקור טוב יותר את הדפוסים האפיגנטיים של תאים במהלך גידולים וגרורות, פיתחנו GPS ייחודי לזיהוי מתילציה של DNA ברחבי הגנום, המכסה עד 96% מאתרי CpG ב-0.4 מיליארד קריאות25.GPS היא שיטת ריצוף דו-צדדית המשתמשת במקטע DNA בקצה 3' של מתיל-ציטוסינים שאינם ניתנים להמרה לאחר טיפול ביסולפיט, המנחה את יישור חישוב המתילציה של ה-DNA של קצה ה-5' דרך רצף קצה זוגי (איור 1)25.הגדיל המנחה מתיל-ציטוזין, הפועל כגדיל תבנית, מסייע ליישור אזורי GC גבוה המשחזר את נתוני הרצף הנטושים ביותר ב-WGBS המסורתי.תכונת הכיסוי הגבוה של GPS מספקת כמות עצומה של מידע מתילציה של DNA, המאפשרת לנו לבחון פרופילי מתילציה של סרטן ברזולוציה גבוהה משמעותית באזורים שלא נחקרו בעבר.

GPS מספק לנו כלי רב עוצמה לחקור את ההומוגניות של הסרטן, מה שיכול לפשט מאוד את מחקר הסרטן ואולי למצוא הסבר אוניברסלי לגידולים וגרורות.בזמן ניתוח נתוני GPS של קווי תאים סרטניים, נתקלה לעתים קרובות בתופעה ייחודית.היו מספר אזורים שנראו היפר-מתילטים בצורה חריגה במספר סוגים של דגימות סרטן.ממצא בלתי צפוי זה אושר לאחר מכן לשמש כ-UCOMs.יותר מ-7,000 דגימות מ-17 סוגי סרטן במסד הנתונים של גנום הסרטן (TCGA) נותחו, ביניהן זיהינו את ה-UCOM הראשון, HIST1H4F, גן הקשור להיסטון שעובר היפר-מתילציה בכל סוגי הסרטן27.לאחר מכן נמצאה סדרה של UCOMs ואומתה במסד הנתונים של TCGA, במסד הנתונים של Gene Expression Omnibus (GEO) ובדגימות קליניות בעולם האמיתי.נכון לעכשיו, HIST1H4F, PCDHGB7 ו-SIX6 נמצאו ואומתו כ-UCOM.הגילוי הבלתי צפוי של UCOMs מציע מענה רב עוצמה לצורך בגילוי מוקדם של סרטן.UCOMs מספקים פתרון לזיהוי סמן בודד של מספר סוגי סרטן.

מאפיינים של UCOMs

לאחר אימות, UCOMs הוכחו כמציגים ארבעה מאפיינים עיקריים המאפשרים UCOMs לעלות על היעילות של סמנים ביולוגיים נוכחיים (איור 2).

ייחודי לממאירות

UCOMs הם ייחודיים לנגעים סרטניים או טרום סרטניים ואינם מושפעים משינויים פיזיולוגיים רגילים.חלק מהסמנים הנוכחיים הקשורים לסרטן שיושמו באופן נרחב בגילוי מוקדם ו/או בהקרנה הובילו לאבחון יתר.רמות גבוהות של PSA, כלי סקר מוסמך קלינית, מתגלות גם במצבים שפירים, כגון היפרפלזיה של הערמונית ודלקת הערמונית10.אבחון היתר וטיפול היתר הנובע מכך מובילים לירידה באיכות החיים עקב סיבוכים במעיים, בשתן ובמיניות28.סמנים ביולוגיים אחרים המבוססים על חלבון ובשימוש נרחב בסביבה הקלינית, כגון CA-125, לא הניבו יתרונות משמעותיים תוך כדי אבחון יתר וטיפול יתר29.הספציפיות הגבוהה של UCOMs לממאירות מונעת את החסרונות הללו.ה-UCOM, PCDHGB7, מבדיל ביעילות נגעים תוך אפיתליאליים קשקשיים (HSILs) וסרטן צוואר הרחם מדגימות רגילות ונגעים תוך אפיתליאליים קשקשיים בדרגה נמוכה (LSILs), בעוד שרוב הסמנים הביולוגיים האחרים יכולים רק להבדיל בין סרטן צוואר הרחם מדגימות רגילות30.למרות ש-PCDHGB7 אינו מזהה הבדלים משמעותיים בין רירית הרחם תקינה והיפרפלזיה של רירית הרחם, הבדלים משמעותיים מתגלים בין רירית הרחם הרגילה והיפרפלזיה לא טיפוסית, והבדלים גדולים עוד יותר מתגלים בין רירית הרחם תקינה לסרטן רירית הרחם (EC) המבוסס על PCDHGB731.UCOMs ייחודיים לנגעים ממאירים במאגרי מידע ובדגימות קליניות.מנקודת מבט של מטופל, UCOMs ייחודיים מפחיתים את הסף להבנת אינדיקציות מורכבות של סמנים ביולוגיים לא יציבים בעלי ביצועים גרועים שונים ואת החרדה המתאימה במהלך תהליך ההערכה.מנקודת המבט של הרופא, UCOMs ייחודיים מבדילים בין נגעים ממאירים לנגעים שפירים, מה שמסייע בטיפול של חולים ומפחית הליכים רפואיים מיותרים וטיפול יתר.לכן, UCOMs ייחודיים מפחיתים את יתירות המערכת הרפואית, מקלים על מצוקת המערכת ומעמידים משאבים רפואיים נוספים לזמינים לנזקקים.

איור 1 סכמטי של זרימת עבודה של GPS לזיהוי מתילציה של DNA25.קו אפור: רצף DNA קלט;קו אדום: DNA שטופל ב-T4 DNA פולימראז, החלפת ציטוזין ב-5'-methylcytosine בקצה 3' של הקלט;כחול C עם Me: ציטוזין מתיל;כחול C: ציטוזין לא מתיל;T צהוב: תימין25.

הכל או לא כלום

UCOMs נמצאים רק בתאי סרטן ומתגלים ביציבות כמעט בכל תאי הסרטן.HIST1H4F אושר להיות היפר-מתילציה כמעט בכל סוגי הגידול אך לא בדגימות רגילות27.באופן דומה, PCDHGB7 ו-SIX6 הוכחו כבעלי היפר-מתילציה בכל דגימות הגידול אך לא בדגימות רגילות30-32.מאפיין ייחודי זה משפר באופן משמעותי את הביצועים של UCOMs ביחס לגבול הזיהוי והרגישות.ניתן להבדיל עד 2% מהתאים הסרטניים בדגימות, מה שהופך את ה-UCOM לסמן ביולוגי רגיש הרבה יותר מרוב הסמנים הביולוגיים הקיימים30. בתור סמן ביולוגי המשמש לזיהוי סרטן המעי הגס, מוטציות KRAS קיימות רק בכ-36% ממקרי סרטן המעי הגס, מצביע על פוטנציאל אבחון לקוי33.השכיחות הנמוכה של מוטציות KRAS בסרטן המעי הגס מגבילה את KRAS בשילוב עם סמנים ביולוגיים אחרים.למעשה, שילוב של סמנים ביולוגיים עשוי להיראות מבטיח בתחילה, אך לא תמיד מייצר תוצאה משביעת רצון תוך הפגנת רעש הרבה יותר גדול בניתוח זיהוי ובדרך כלל כרוך בהליכים ניסויים מסובכים יותר.לעומת זאת, PCDHGB7 ו-UCOMs אחרים קיימים בכל סוגי הסרטן.UCOMs מזהים רכיבים סרטניים בסוגים שונים של דגימות סרטן בדיוק רב תוך מיגור תהליכי ניתוח מורכבים לביטול רעשים.לא קשה לזהות סרטן בדגימה בשפע, אבל זה מאתגר ביותר לגלות סרטן בדגימה קטנה.UCOMs מסוגלים לזהות כמויות קטנות של סרטן.

איור 2 מאפיינים של UCOMs.

גילוי סרטן לפני שינויים פתולוגיים

ניתן לזהות UCOMs בשלב הטרום סרטני לפני שינויים פתולוגיים.כסמנים ביולוגיים אפיגנטיים, חריגות UCOM מתרחשות בשלב מוקדם יותר מאשר חריגות פנוטיפיות וניתנות לזיהוי לאורך כל הגידול, התקדמות וגרורות34,35.הרגישות של UCOM לאורך זמן משפרת את ביצועי UCOM בזיהוי סרטן בשלב מוקדם ונגעים טרום סרטניים.גילוי סרטן מוקדם על בסיס ביופסיות וציטולוגיה יכול להיות קשה אפילו לפתולוגים המנוסים ביותר.ביופסיה בודדת שנרכשה באמצעות קולפוסקופיה דווחה כחיובית ב-60.6% מדגימות HSIL+.נדרשות ביופסיות נוספות עבור נגעים מרובים כדי להגביר את הרגישות36.לעומת זאת, ל-UCOM, PCDHGB7, יש רגישות של 82% עבור דגימות HSIL+, העולה על הרגישות של ביופסיות ורוב הסמנים הביולוגיים30.לסמן המתילציה, FAM19A4, יש רגישות של 69% ל-CIN2+, הדומה לציטולוגיה, אך אינו יכול להבדיל בין CIN1 לדגימות רגילות37.UCOMs הוכחו כסמן ביולוגי לגילוי מוקדם הרבה יותר רגיש.בהשוואה לפתולוגים מבוססי ניסיון, ל-UCOMs יש רגישות זיהוי מעולה לסרטן בשלבים מוקדמים, מה שבתורו תורם לשיפור פרוגנוזה והישרדות סרטן30.בנוסף, UCOMs מציעים פלטפורמת זיהוי הנגישה לאזורים חסרי פתולוגים מנוסים ומשפרת מאוד את יעילות הגילוי.עם נהלי דגימה וזיהוי אחידים, זיהוי UCOM מניב תוצאות יציבות וקלות לפירוש שמתאימות יותר לפרוטוקול מיון הדורש פחות כוח אדם מקצועי ומשאבים רפואיים.

קל לזיהוי

השיטות הנוכחיות לזיהוי מתילציה של DNA הן מסובכות וגוזלות זמן.רוב השיטות דורשות טרנספורמציה של ביסולפיט, מה שגורם לאובדן איכות הדגימה ואולי מייצר תוצאות לא יציבות ולא מדויקות.יכולת השחזור הלקויה הנגרמת על ידי טיפול ביסולפיט עשויה להוביל לבלבול עבור רופאים ומטופלים ולהפריע עוד יותר לאסטרטגיות המעקב ו/או הטיפול.לכן, שינינו עוד יותר את השיטה של ​​זיהוי UCOM כדי למנוע טיפול ביסולפיט בעייתי בדגימות, להתאים לדרישות היישום הקליני ולשפר את הנגישות.פיתחנו שיטה חדשה תוך שימוש באנזימי הגבלה רגישים למתילציה בשילוב עם PCR כמותי פלואורסצנטי בזמן אמת (Me-qPCR) כדי לכמת את מצב המתילציה של UCOM תוך 3 שעות תוך שימוש בהליכי טיפול קלים (איור 3).Me-qPCR יכול להכיל מספר סוגי דגימות, כגון איסוף קליני של נוזלי גוף ודגימות שתן שנאספו באופן עצמי.ניתן לעבד דגימות קליניות שנאספו, לאחסן ולהמשיך בקלות לזיהוי באמצעות מיצוי DNA סטנדרטי ואוטומטי.לאחר מכן ניתן ליישם את ה-DNA המופק ישירות על פלטפורמת Me-qPCR עבור תגובה בסיר אחד ותוצאות כימות פלט.לאחר ניתוח תוצאות פשוט באמצעות מודלים אבחוניים שהותאמו ואומתו לסוגי סרטן ספציפיים, הקביעה הסופית של תוצאות זיהוי UCOM מתפרשת ומוצגת כערך חצי כמותי.פלטפורמת Me-qPCR מתעלה על רצף הביסולפיט המסורתי בזיהוי UCOM תוך חיסכון של 3 שעות המרה של ביסולפיט, על פי פרוטוקול EZ DNA Methylation-Gold Kit.פלטפורמת זיהוי המתילציה החדשנית הופכת את זיהוי UCOM ליציב יותר, מדויק יותר ונגיש יותר30.

איור 3 תהליך זיהוי של UCOMs.סוגי הדגימות כוללים BALF שנדגמו באופן מקצועי, מברשת פאפ ו/או שתן שנאסף בעצמו.תהליך מיצוי ה-DNA יכול להיות מותאם למחלץ אוטומטי, את התוצר שלו ניתן לזהות ישירות על ידי qPCR.

יישום של UCOMs

סרטן ריאות

סרטן הריאות הוא הסרטן השני בשכיחותו והקטלני ביותר בעולם, המהווה 11.4% מהמקרים החדשים ו-18.0% ממקרי המוות החדשים1.מבין כל האבחנות, 85% הם סרטן ריאות של תאים לא קטנים (NSCLC) ו-15% הם סרטן ריאות של תאים קטנים (SCLC), שיש לו רמה גבוהה יותר של ממאירות38.סריקת טומוגרפיה ממוחשבת במינון נמוך (LDCT) היא שיטת הסקר המומלצת כיום לסרטן ריאות והוכחה כמשפרת את הגילוי המוקדם ומפחיתה את התמותה6;עם זאת, בשל סגוליות נמוכה ונגישות לקויה, LDCT עדיין לא שימש כשיטת סקר מספקת, כמו גם סמני סרטן נפוצים אחרים, כגון CEA39.העלויות והפוטנציאל להחמצת אבחנות ואבחונים שגויים של אסטרטגיית הסקר LDCT מעכבים את התקדמות קידום הסקר לסרטן ריאות40.ל-HIST1H4F, UCOM, יש פוטנציאל עצום כסמן ביולוגי לגילוי מוקדם בדגימות נוזל ברונכואלוואולרי (BALF)27.HIST1H4F הוא hypermethylated באדנוקרצינומה ריאות וקרצינומה של תאי קשקש, עם סגוליות זיהוי של 96.7% ורגישות של 87.0% (איור 4A), וביצועים יוצאי דופן עבור סרטן בשלב I27.ל-HIST1H4F יש סגוליות של 96.5% ורגישות של 85.4% עבור NSCLC, ו-96.5% ו-95.7%, בהתאמה, עבור SCLC27.בנוסף, דגימות של שמונה סוגים אחרים של סרטן, כולל סרטן הלבלב והמעי הגס, אימתו ש-HIST1H4F עובר היפר-מתילציה בכל שמונת הסוגים27.

סרטן צוואר רחם

סרטן צוואר הרחם היה הסרטן הרביעי בשכיחותו והגורם הרביעי למקרי מוות מסרטן בנשים בשנת 2020, המהווה 3.1% מהמקרים החדשים ו-3.4% ממקרי המוות הקשורים לסרטן ברחבי העולם1.כדי לחסל את סרטן צוואר הרחם עד 2030, כפי שהוצע על ידי ארגון הבריאות העולמי, גילוי מוקדם של סרטן צוואר הרחם הוא הכרח.אם מתגלה בשלב מוקדם, שיעור ההישרדות ל-5 שנים מגיע ל-92% עם סרטן צוואר הרחם פולשני41.הנחיות האגודה האמריקנית לסרטן (ACS) מציעות בדיקות ציטולוגיה של צוואר הרחם, בדיקות HPV ראשוניות, או בדיקות קו-בדיקות להקרנה42.ציטולוגיה של צוואר הרחם היא פולשנית ויכולה לזהות רק 63.5% ממקרי CIN2+37.

PCDHGB7, לעומת זאת, הציג ביצועים טובים בהרבה באמצעות מריחות פאפ והפרשות נרתיק, והוא יכול להבדיל ביעילות בין HSIL ל-LSIL בשלב מוקדם במיוחד.ל-PCDHGB7 לבדו יש רגישות של 100.0% וסגוליות של 88.7% לסרטן צוואר הרחם (איור 4B), ורגישות של 82.1% וספציפיות של 88.7% עבור דגימות HSIL+30.ל-PCDHGB7 יש גם רגישות של 90.9% וספציפיות של 90.4% בדגימות הפרשת נרתיק לסרטן צוואר הרחם, שקל יותר לאסוף אותן30.בשילוב עם בדיקת HPV בסיכון גבוה (שעה) או Thinprep Cytology Test (TCT), ל-PCDHGB7 יש רגישות מוגברת של 95.7% וסגוליות של 96.2%, העולה משמעותית על זו של בדיקת hrHPV (20.3%), TCT (51.2% ), והשניים ביחד (57.8%) לסרטן צוואר הרחם30.כמו כן, הוכח כי PCDHGB7 מקבל היפר-מתילציה ב-17 סוגי סרטן ממסד הנתונים של TCGA, מה שמצביע על התאמתו למשפחת UCOM30.

איור 4 UCOMs אושרו בארבעה סוגי סרטן במחקרים קליניים בקנה מידה גדול.א. ביצועים של HIST1H4F, UCOM, בזיהוי סרטן ריאות של 508 דגימות.ב. ביצועים של PCDHGB7, UCOM, בזיהוי סרטן צוואר הרחם של 844 דגימות.ג. ביצועים של PCDHGB7, UCOM, בזיהוי סרטן רירית הרחם של 577 דגימות פאפ רירית הרחם ומברשת טאו.ד. ביצועים של SIX6, UCOM, בזיהוי סרטן אורותל של 177 דגימות.

EC

EC הוא אחד מסוגי הסרטן הנפוצים ביותר של מערכת הרבייה הנשית ברחבי העולם, עם מוערך של 4.2 מיליון מקרים חדשים ו-1% ממקרי המוות הקשורים לסרטן מדי שנה1.עם אבחנה מוצלחת בשלב מוקדם, EC ניתן לריפוי ויש לו שיעור הישרדות של 5 שנים של 95% לסרטן בשלב I.חולים עם סימפטומטיות, כגון דימום רחמי לא תקין, מקבלים הערכה קלינית תקופתית ועוברים פרוצדורות ביופסיה פולשניות וכואבות, למרות שרק 5%-10% מפתחים בסופו של דבר EC43.אולטרסאונד טרנס-ווגינלי, כשיטת הזיהוי הנפוצה, הוא מאוד לא מהימן בשל חוסר יכולתו להבדיל בין שינויים שפירים מאנדומטריאליים ממאירים והשיעור הגבוה של חיובי שגויים44.

נערכה השוואה מקבילה של סרום CA-125, סמן ביולוגי EC מיושם באופן נרחב, ו-PCDHGB7.לסרום CA-125 הייתה רגישות של 24.8%, מה שמצביע על כך ש-CA-125 הוא סמן לא מספק ל-EC למרות סגוליות של 92.3%31.זיהוי PCDHGB7 באמצעות דגימות מברשת Pap הניב רגישות של 80.65% וסגוליות של 82.81% עבור שלבי ECatall, בעוד שלמברשת Tao הייתה רגישות של 61.29% וסגוליות של 95.31%31.מודל האבחון PCDHGB7, המבוסס על Me-qPCR, הניב רגישות של 98.61%, סגוליות של 60.5% ודיוק כולל של 85.5%, באמצעות דגימות מברשת Pap ו-Tao (איור 4C)31.

סרטן אורותל

סרטן אורותל, המורכב מסרטן שלפוחית ​​השתן, אגן הכליה וסרטן השופכן, היה הסרטן השביעי בשכיחותו ב-2020 ברחבי העולם, וגרם ל-5.2% מהמקרים החדשים ול-3.9% ממקרי המוות1.סרטן אורותל, יותר מ-50% מהם הם סרטן שלפוחית ​​השתן, היו הסרטן הרביעי בשכיחותו בארצות הברית בשנת 2022, והיוו 11.6% מהמקרים החדשים שאובחנו3.כ-75% ממקרי סרטן שלפוחית ​​השתן מסווגים כסרטן שלפוחית ​​השתן שאינו פולשני שרירי מוגבל לרירית או תת-רירית45.ביופסיית ציסטוסקופיה היא תקן הזהב לאבחון סרטן אורותל המיושמת על ידי פלואורסצנטי הכלאה באתרו (FISH) ובדיקות ציטולוגיה.ל-FISH ולציטולוגיה יש ביצועי אבחון גרועים, והציסטוסקופיה היא חודרנית ויש לה את הסיכון הבסיסי להחמצת מיקרו-נגעים, פירוש שגוי של נגעים ואפשרי לגרום להתפשטות או הישנות של סרטן46.ה-UCOM המאומת בעבר, PCDHGB7, הוכח גם כהיפר-מתיל בסרטן אורותל, עם שטח מתחת לעקומה של 0.86, מה שמצביע על יכולת אבחון פוטנציאלית30.כדי לאמת עוד יותר UCOMs ולהכיל יותר סוגי דגימות, SIX6, UCOM חדש, נבדק והראה פוטנציאל אבחוני מצוין בזיהוי מוקדם של סרטן urothelial באמצעות דגימות שתן בפלטפורמת Me-qPCR.זיהוי SIX6 באמצעות דגימות שתן הראה רגישות תחרותית של 86.7% וסגוליות של 90.8% (איור 4D), תוך שהוא לא פולשני וקל לרכישה32.הפוטנציאל של SIX6 בניטור גרורות והערכת יעילות הטיפול נמצא כעת בבדיקה.

העתיד והאתגרים

ל-UCOM יש ביצועים חזקים בפוטנציאל האבחון של מספר סוגי סרטן, אך נותרה עבודה רבה לעשות.הרחבנו את רשימת ה-UCOMs ועשינו אימות אקטיבי של UCOMs בסוגים נוספים של סרטן, כולל אלו שבאופן מסורתי קשה לזהות.תוצאות אימות מבסיסי נתונים של TCGA איששו עוד יותר את היישום של UCOMs בסוגים רבים יותר של סרטן ובמצבים נוספים.בחקירה ראשונית, הוכח כי ל-UCOMs יש פוטנציאל אבחוני חזק עבור cholangiocarcinomas ואדנוקרצינומות של הלבלב, שכמעט בלתי אפשרי לאבחן בשלב מוקדם עם שיטות ההקרנה הנוכחיות32,47.היכולת לזהות סרטן נדיר עם UCOMs יכולה להיות מנוצלת עם DNA במחזור הדם (ctDNA) על ידי פלטפורמת ביופסיה נוזלית משופרת48.מחקר שכלל פאנל לגילוי פאן-סרטן מבוסס-DNA פלזמה העלה רגישות של 57.9%49.למרות הספציפיות הגבוהה, הביצועים הכוללים חושפים שעדיין יש מקום לשיפור.

המאפיינים הייחודיים של UCOMs תמכו גם בחקירת פוטנציאל ה-UCOM בהערכת יעילות הטיפול ובניטור הישנות.על פי קריטריוני הערכת תגובה בגידולים מוצקים (RECIST), הדמיה רפואית היא המתודולוגיה המומלצת לניטור הישנות והערכת יעילות הטיפול, בעוד שסמני גידול משמשים לבד להערכה50.אולם במציאות, גישות הדמיה מושפעות במידה רבה מהתדירות ומהתזמון, ולכן חושפות את המטופלים לסיכון ולעלויות גבוהות יותר51,52.SIX6 אושרה כדי לשמש מנבא לגרורות של סרטן השד32.ניטור ctDNA המבוסס על ביופסיה נוזלית מאפשר מעקב בזמן אמת על מחלה מינימלית חודשים לפני גילוי רדיולוגי, ובאופן אידיאלי מעכב ומונע התקדמות סרטן הקשורה להישנות 53.תוצאות ראשוניות מצביעות על כך ש-UCOMs משקפים את רמת ההיפר-מתילציה הסרטנית בזמן אמת מיד לאחר הניתוח והטיפול32.הרגישות הגבוהה שמפגינים UCOMs והישימות במספר סוגי דגימות לא פולשניות מאפשרת ל-UCOM לשמש כסמן ביולוגי לניטור הישנות מדויק תוך שמירה על תאימות גבוהה של המטופלים.

יחד עם זאת, נגישות הציבור למבחן היא נושא מרכזי נוסף הדורש מאמץ נוסף.בעוד ששיתופי פעולה לזיהוי UCOM אומצו בבתי חולים נוספים בתקווה להועיל ליותר חולים, זיהוי והקרנות פרו בונו בוצעו באופן פעיל באזורים הכפריים של סין.UCOMs דורשים נגישות משופרת כדי להעפיל ככלי סינון אפשרי, במיוחד עבור אזורים לא מפותחים.

בעוד שתוצאות יישום UCOM בגילוי מוקדם מבטיחות, קיימים הרבה לא ידועים לגבי UCOM.עם חקירה פעילה, יש צורך במחקר נוסף על הסיבה לכך ש-UCOMs נוכחים באופן אוניברסלי בסוגי סרטן.מנגנוני הוויסות האפיגנטי שבבסיס UCOMs ראויים לחקירה נוספת, מה שיכול להצדיק כיוון חדש לטיפול בסרטן.אם נחזור למשחק הגומלין בין הומוגניות הגידול להטרוגניות, אנו מעוניינים מדוע UCOMs יכולים להיות חריגים לרוב הסמנים הביולוגיים לסרטן הקשורים בקשר הדוק לסוגי סרטן ספציפיים.תפקידן של סטיות מתילציה מזוהות ב-DNA בגידול הגידול, התקדמות הגידול וגרורות לא נקבע בתהליך של איבוד והחזרת זהות התא ומצריך בדיקה יסודית.עניין מרכזי נוסף טמון בהיקף השילוב של תכונת ההומוגניות של UCOM עם סמנים ייחודיים לרקמות בתקווה להתקרב לגילוי מדויק של עקבות סרטן וזיהוי מקורות רקמת הגידול באופן הפוך.UCOMs יכולים להוות כלי אידיאלי למניעת סרטן, זיהוי סרטן ופוטנציאל להגן ולהעלים סרטן.

הענק תמיכה

עבודה זו נתמכה על ידי תוכנית המחקר והפיתוח הלאומית של סין (מענק מס' 2022BEG01003), הקרן הלאומית למדעי הטבע של סין (מענק מס' 32270645 ו-32000505), מענק מוועדת הבריאות המחוזית של היילונגג'יאנג (מענק מס' 2020-111) , ומענק ממכון Heze למדע וטכנולוגיה (מענק מס' 2021KJPT07).

הצהרת ניגוד אינטרסים

Wei Li הוא מנהל המו"פ של Shanghai Epiprobe Biotechnology Co., Ltd. Wenqiang Yu מכהן במועצת הייעוץ המדעית של Epiprobe.W. Yu ו-Epiprobe אישרו פטנטים ממתינים הקשורים לעבודה זו.כל שאר המחברים מצהירים שאין להם אינטרסים מתחרים.

תרומות מחבר

הגו ועיצבו את הפרויקט: Chengchen Qian ו- Wenqiang Yu.

כתב את המאמר: Chengchen Qian.

הכין את האיורים: Chengchen Qian.

סקר וערך את כתב היד: Xiaolong Zou, Wei Li, Yinshan Li ו- Wenqiang Yu.

הפניות

1. Sung H, Ferlay J, Siegel RL, LaversanneM, Soerjomataram I, Jemal A, et al.סטטיסטיקת סרטן עולמית 2020: הערכות GLOBOCAN של

שכיחות ותמותה ברחבי העולם עבור 36 סוגי סרטן ב-185 מדינות.CA Cancer J Clin.2021;71: 209-49.

2. Xia C, Dong X, Li H, Cao M, Sun D, ​​He S, et al.נתונים סטטיסטיים של סרטן בסין ובארצות הברית, 2022: פרופילים, מגמות וקובעות.Chin MedJ (אנגלית).2022;135: 584-90.

3. Siegel RL, Miller KD, WagleNS, JemalA.סטטיסטיקת סרטן, 2023. CA Cancer J Clin.2023;73: 17-48.

4. Crosby D, BhatiaS, Brindle KM, Coussens LM, Dive C, Emberton M, et al.גילוי מוקדם של סרטן.מַדָע.2022;375: eaay9040.

5. Ladabaum U, Dominitz JA, KahiC, Schoen RE.אסטרטגיות עבור

בדיקת סרטן המעי הגס.גסטרואנטרולוגיה.2020;158: 418-32.

6. Tanoue LT, Tanner NT, Gould MK, Silvestri GA.בדיקת סרטן ריאות.Am J Respir Crit Care Med.2015;191: 19-33.

7. Bouvard V, WentzensenN, Mackie A, Berkhof J, BrothertonJ, Giorgi-Rossi P, et al.נקודת המבט של IARC על בדיקת סרטן צוואר הרחם.N EnglJ Med.2021;385: 1908-18.

8. Xue P, Ng MTA, QiaoY.האתגרים של קולפוסקופיה לבדיקת סרטן צוואר הרחם ב-LMICs ופתרונות על ידי בינה מלאכותית.BMC Med.2020;18: 169.

9. Johnson P, Zhou Q, Dao DY, Lo YMD.סמנים ביולוגיים במחזור באבחון וניהול של קרצינומה כבדית.Nat Rev Gastroenterol Hepatol.2022;19: 670-81.

10. Van PoppelH, Albreht T, Basu P, HogenhoutR, CollenS, Roobol M. Serum PSA-based זיהוי מוקדם של סרטן הערמונית באירופה ובעולם: עבר, הווה ועתיד.נת ר' אורול.2022;19:

562-72.

11. HolyoakeA, O'Sullivan P, Pollock R, Best T, Watanabe J, KajitaY,

et al.פיתוח בדיקת שתן מרובה RNA לאיתור וריבוד של קרצינומה של תאי מעבר של שלפוחית ​​השתן.Clin Cancer Res.2008;14: 742-9.

12. Feinberg AP, Vogelstein B. Hypomethylation מבדיל גנים של כמה סוגי סרטן אנושיים מעמיתיהם הרגילים.טֶבַע.1983;301: 89-92.

13. Ng JM, Yu J. Promoter hypermethylation של גנים מדכאי גידולים כסמנים ביולוגיים פוטנציאליים בסרטן המעי הגס.IntJ Mol Sci.2015;16: 2472-96.

14. Esteller M. Epigenomics של סרטן: מתילומות DNA ומפות היסטון-שינוי.נאט ר' ג'נט.2007;8: 286-98.

15. Nishiyama A, Nakanishi M. ניווט בנוף המתילציה של DNA של סרטן.טרנדים ג'נט.2021;37: 1012-27.

16. Xie W, Schultz MD, ListerR, Hou Z, Rajagopal N, Ray P, et al.ניתוח אפיגנומי של התמיינות רב שושלת של תאי גזע עובריים אנושיים.תָא.2013;153: 1134-48.

17. Li Y, Zheng H, Wang Q, Zhou C, WeiL, Liu X, et al.ניתוחים רחבי הגנום חושפים תפקיד של Polycomb בקידום היפו-מתילציה של עמקי מתילציה של DNA.גנום ביול.2018;19:18.

18. Koch A, JoostenSC, Feng Z, de Ruijter TC, DrahtMX, MelotteV,

et al.ניתוח של מתילציה של DNA בסרטן: מיקום חוזר.נאט ר' קלינ אונקול.2018;15: 459-66.

19. KleinEA, Richards D, Cohn A, TummalaM, Lapham R, Cosgrove D, et al.אימות קליני של מבחן רב-סרטני לגילוי מוקדם מבוסס מתילציה ממוקד באמצעות ערכת אימות עצמאית.אן אונקול.2021;32: 1167-77.

20. חנן ד, וינברג ר"ע.סימני ההיכר של הסרטן.תָא.2000;100: 57-70.

21. Hanahan D. סימני ההיכר של הסרטן: מימדים חדשים.סרטן דיסקוב.2022;12: 31-46.

22. Schwartzberg L, Kim ES, Liu D, Schrag D. Precision Oncology: מי, איך, מה, מתי ומתי לא?Am Soc Clin Oncol Educ Book.2017: 160-9.

23. Liu H, Meng X, Wang J. מתילציה כמותית בזמן אמת

זיהוי של גן PAX1 בבדיקת סרטן צוואר הרחם.IntJ Gynecol Cancer.2020;30: 1488-92.

24. Imperiale TF, RansohoffDF, Itzkowitz SH, Levin TR, Lavin P, Lidgard GP, et al.בדיקת DNA מרובת מטרות לצואה לבדיקת סרטן המעי הגס והחלחולת.N EnglJ Med.2014;370: 1287-97.

25. Li J, Li Y, Li W, Luo H, Xi Y, Dong S, et al.מיקום מדריך

ריצוף מזהה דפוסי מתילציה חריגים של DNA שמשנים את זהות התא ורשתות מעקב גידול-אימוניות.גנום

מילון2019;29: 270-80.

26. Gao Q, LinYP, Li BS, Wang GQ, Dong LQ, Shen BY, et al.זיהוי רב-סרטני לא פולשני על ידי רצף מתילציה של DNA ללא תאים (THUNDER): פיתוח ומחקרי אימות עצמאיים.אן אונקול.2023;34: 486-95.

27. Dong S, Li W, Wang L, Hu J, Song Y, Zhang B, et al.גנים הקשורים להיסטון עוברים היפר-מתיל בסרטן ריאות והיפר-מתיל

HIST1H4F יכול לשמש כסמן ביולוגי לסרטן.Cancer Res.2019;79: 6101-12.

28. HeijnsdijkEA, Wever EM, AuvinenA, Hugosson J, Ciatto S, Nelen V, et al.השפעות איכות חיים של בדיקת אנטיגן ספציפי לערמונית.N EnglJ Med.2012;367: 595-605.

29. LuzakA, Schnell-Inderst P, Bühn S, Mayer-Zitarosa A, Siebert U. יעילות קלינית של בדיקות ביולוגיות לבדיקת סרטן המוצעות כשירות בריאות בתשלום עצמי: סקירה שיטתית.Eur J בריאות הציבור.2016;26: 498-505.

30. Dong S, Lu Q,Xu P, Chen L, Duan X, Mao Z, et al.

Hypermethylated PCDHGB7 כסמן אוניברסלי לסרטן בלבד ויישומו בהקרנה מוקדמת של סרטן צוואר הרחם.Clin Transl Med.2021;11: e457.

31. Yuan J, Mao Z, Lu Q,Xu P, Wang C, Xu X, et al.Hypermethylated PCDHGB7 כסמן ביולוגי לגילוי מוקדם של סרטן רירית הרחם בדגימות מברשת רירית הרחם וגרידות צוואר הרחם.פרונט מול ביוסקי.2022;8: 774215.

32. Dong S, Yang Z,Xu P, Zheng W, Zhang B, Fu F, et al.הֲדָדִית

שינוי אפיגנטי בלעדי ב-SIX6 עם היפר-מתילציה לאיתור שלב טרום סרטני ומעקב אחר הופעת גרורות.מטרת העברת אותות Ther.2022;7: 208.

33. Huang L, Guo Z,Wang F, Fu L. KRAS מוטציה: מבלתי ניתנת לתרופה לתרופה בסרטן.מטרת העברת אותות Ther.2021;6: 386.

34. Belinsky SA, Nikula KJ, PalmisanoWA, MichelsR, SaccomannoG, GabrielsonE, et al.מתילציה חריגה של p16(INK4a) היא אירוע מוקדם בסרטן ריאות וסמן ביולוגי פוטנציאלי לאבחון מוקדם.Proc Natl Acad Sci U SA.1998;95: 11891-6.

35. רוברטסון KD.מתילציה של DNA ומחלות אנושיות.נאט ר' ג'נט.2005;6: 597-610.

36. WentzensenN, Walker JL, Gold MA, Smith KM, ZunaRE,

Mathews C, et al.ריבוי ביופסיות ואיתור מבשרי סרטן צוואר הרחם בקולפוסקופיה.J Clin Oncol.2015;33: 83-9.

37. De Strooper LM, Meijer CJ, Berkhof J, Hesselink AT, Snijders

PJ, Steenbergen RD, et al.ניתוח מתילציה של FAM19A4

הגן בשריטות צוואר הרחם יעיל ביותר בזיהוי צוואר הרחם

קרצינומות ונגעים מתקדמים של CIN2/3.Cancer Prev Res (Phila).2014;7: 1251-7.

38. Thai AA, Solomon BJ, Sequist LV, Gainor JF, Heist RS.סרטן ריאות.אִזְמֵל.2021;398: 535-54.

39. Grunnet M, Sorensen JB.אנטיגן קרצינואמבריוני (CEA) כסמן גידול בסרטן ריאות.סרטן ריאות.2012;76: 138-43.

40. Wood DE, KazerooniEA, Baum SL, EapenGA, EttingerDS, Hou L, et al.בדיקת סרטן ריאות, גרסה 3.2018, הנחיות תרגול קליני של NCCN באונקולוגיה.J Natl Compr Canc Netw.2018;16: 412-41.

41. האגודה האמריקאית לסרטן.עובדות ונתונים על סרטן.אטלנטה, ג'ורג'יה, ארה"ב: האגודה האמריקאית לסרטן;2023 [עודכן 2023 1 במרץ;מצוטט 2023 22 באוגוסט].

42. FonthamETH, Wolf AMD, Church TR, EtzioniR, Flowers CR,

הרציג א, ואח'.בדיקת סרטן צוואר הרחם עבור אנשים בסיכון ממוצע: עדכון הנחיות לשנת 2020 מאת האגודה האמריקנית לסרטן.CA Cancer J Clin.2020;70: 321-46.

43. Clarke MA, Long BJ, Del Mar MorilloA, Arbyn M, Bakkum-Gamez JN, Wentzensen N. איגוד של סיכון לסרטן רירית הרחם עם דימום לאחר גיל המעבר בנשים: סקירה שיטתית ומטה-אנליזה.JAMA מתמחה מד.2018;178: 1210-22.

44. Jacobs I, Gentry-MaharajA, Burnell M, ManchandaR, Singh N,

שארמה א, ועוד.רגישות של בדיקת אולטרסאונד טרנסווגינלית

לסרטן רירית הרחם בנשים לאחר גיל המעבר: מחקר מקרה-ביקורת בתוך קבוצת UKCTOCS.לנצט אונקול.2011;12: 38-48.

45. BabjukM, Burger M, CompératEM, Gontero P, MostafidAH,

PalouJ, et al.הנחיות האיגוד האירופי לאורולוגיה בנושא סרטן שלפוחית ​​השתן שאינו חודר לשרירים (TaT1 וקרצינומה במקום) -

עדכון 2019.יורו Urol.2019;76: 639-57.

46. ​​Aragon-Ching JB.אתגרים והתקדמות באבחון, ביולוגיה וטיפול בקרצינומות של דרכי השתן העליונות ושלפוחית ​​השתן.אורול אונקול.2017;35: 462-4.

47. Rizvi S, KhanSA, Hallemeier CL, Kelley RK, Gores GJ.

Cholangiocarcinoma - מושגים מתפתחים ואסטרטגיות טיפוליות.נאט ר' קלינ אונקול.2018;15: 95-111.

48. Ye Q, Ling S, Zheng S, Xu X. Biopsy Liquid in hepatocellular

קרצינומה: תאי גידול במחזור ו-DNA של גידול במחזור.מול סרטן.2019;18:114.

49. Zhang Y, Yao Y, Xu Y, Li L, Gong Y, Zhang K, ועוד.פאן-סרטן

זיהוי DNA של גידול במחזור בלמעלה מ-10,000 חולים סיניים.נאט קומון.2021;12:11.

50. Eisenhauer EA, Therasse P, BogaertsJ, Schwartz LH, Sargent D, Ford R, et al.קריטריונים חדשים להערכת תגובה בגידולים מוצקים: הנחיות RECIST מתוקנות (גרסה 1.1).Eur J Cancer.2009;45: 228-47.

51. LitièreS, Collette S, de Vries EG, Seymour L, BogaertsJ.RECIST - ללמוד מהעבר כדי לבנות את העתיד.נאט ר' קלינ אונקול.

2017;14: 187-92.

52. Seymour L, BogaertsJ, Perrone A, FordR, Schwartz LH, Mandrekar S, et al.iRECIST: הנחיות לקריטריונים לתגובה לשימוש בניסויים

בדיקת אימונותרפיה.לנצט אונקול.2017;18: e143-52.

53. PantelK, Alix-Panabières C. ביופסיה נוזלית ומחלה שארית מינימלית - ההתקדמות וההשלכות האחרונות לריפוי.נאט ר' קלינ אונקול.2019;16: 409-24.

ציטו מאמר זה כ: Qian C, Zou X, Li W, Li Y, Yu W. המאחז נגד סרטן: סמנים אוניברסליים לסרטן בלבד.סרטן ביול מד.2023;20: 806-815.

doi: 10.20892/j.issn.2095-3941.2023.0313